La citometria a flusso è una tecnica diagnostica e di ricerca nota da molti anni e ampiamente utilizzata in oncologia. La citometria a flusso consente di esaminare le cellule che compongono la sospensione in un flusso liquido laminare o stratificato con un dispositivo chiamato citometro a flusso. Quali sono le indicazioni per la citometria a flusso e come si fa?

Citometria a flussoè usata nella diagnosi delle neoplasie ematologiche perché sono tumori liquidi, ma è solo un metodo ausiliario. Tuttavia, vale la pena ricordare che esiste un cancro che può essere diagnosticato solo con questo metodo. Questa è leucemia linfocitica cronica.

In altre malattie neoplastiche, la citometria a flusso viene utilizzata come ausilio diagnostico in quanto mostra caratteristiche molto importanti delle cellule neoplastiche. Questo metodo viene utilizzato anche per valutare l'efficacia del trattamento applicato.

Citometria a flusso: cosa mostra?

Il flusso liquido contenente le particelle di prova scorre a velocità costante (100-2000 particelle al secondo) attraverso l'area di misurazione del citometro. Qui, i metodi ottici vengono utilizzati per analizzare forme, dimensioni, struttura interna delle cellule e il loro contenuto, ad esempio il DNA. Tutte le celle sono etichettate otticamente.

Per le misurazioni vengono utilizzate le proprietà di diffusione della luce laser da parte delle singole cellule o dei loro componenti (nuclei, cromosomi, mitocondri) o la fluorescenza da esse indotta.

I segnali ottici vengono convertiti in segnali elettrici che, dopo l'analisi, vengono presentati graficamente sotto forma di distribuzioni mono o biparametriche

Il citometro abilita anche la segregazione delle particelle dopo l'uscita dalla zona di misurazione. Si può dire che l'apparato dispone (segrega) cellule con gli stessi elementi costitutivi (ordinamento preparatorio) o estrae tipi specifici di cellule (ordinamento analitico).

La citometria a flusso consente lo studio delle caratteristiche della popolazione delle cellule, l'analisi dei componenti cellulari (soprattutto come acidi nucleici, proteine, antigeni di superficie e cellulari), l'attività enzimatica, il potenziale di membrana, l'attività mitocondriale, il pH intracellulare, il trasporto ionico e fluidità della membrana

Citometria a flusso - applicazione

Usato nella diagnosticala citometria a flusso permette di determinare il fenotipo delle cellule neoplastiche e l'espressione delle singole proteine. Per ottenere ciò, vengono utilizzati anticorpi fluorescenti marcati che si legano in modo caratteristico agli antigeni sulla superficie della membrana cellulare. Grazie a ciò, è possibile determinare il grado della loro differenziazione, l'origine, i marcatori prognostici e terapeutici, che facilitano la decisione su ulteriori procedure diagnostiche e terapeutiche.

Un' altra applicazione per la citometria a flusso è il monitoraggio dell'efficacia del trattamento applicato valutando la cosiddetta "malattia residua", che è la percentuale di cellule con fenotipi simili a tumori che rimangono dopo il trattamento.

La citometria a flusso facilita anche la ricerca sul cancro. Grazie a questo metodo è possibile ricercare, ad esempio, i recettori che si trovano sulla superficie delle cellule neoplastiche e possono diventare un bersaglio per il trattamento.

Il metodo permette di valutare l'attività delle proteine ​​all'interno della cellula. È anche possibile valutare il ciclo cellulare, ad esempio determinando la quantità di DNA nella cellula

Nel corso della proliferazione, una cellula attraversa fasi del ciclo cellulare in cui raddoppia la quantità di DNA. Valutando questa quantità, è possibile indicare in quale fase si trovano le cellule, se stanno proliferando o meno o se stanno andando in apoptosi. In altre parole, con l'aiuto della citometria a flusso puoi scoprire se le cellule si stanno preparando per l'apoptosi, che è il processo di morte programmata.

Citometria a flusso - il futuro

La citometria a flusso è nota e utilizzata in medicina da diverse decine di anni. Tuttavia, viene costantemente migliorato e crea nuove possibilità diagnostiche e di ricerca. Nel primo periodo di utilizzo di questo metodo, è stato possibile determinare solo la dimensione e il grado di granularità delle cellule.

L'uso della luce laser nei dispositivi di citometria a flusso consente di eccitare determinati marker fluorescenti e quindi di valutarne l'emissione. I moderni citometri consentono un aumento significativo del numero di marcatori che vengono valutati contemporaneamente, il che si traduce sicuramente in un aumento della sensibilità di questo metodo.

Per questo motivo viene utilizzato non solo per diagnosticare malattie neoplastiche, ma anche per valutare l'efficacia del trattamento.

Circa l'autoreAnna Jarosz Giornalista che da oltre 40 anni si occupa di divulgazione dell'educazione sanitaria. Vincitore di numerosi concorsi per giornalisti che si occupano di medicina e salute. Ha ricevuto, tra gli altri Il Trust Award "Golden OTIS" nella categoria "Media e salute", St. Kamila premiata nell'occasioneGiornata Mondiale del Malato, due volte "Penna di cristallo" in un concorso nazionale per giornalisti che promuovono la salute, e molti premi e riconoscimenti nei concorsi per il "Giornalista medico dell'anno" organizzato dall'Associazione polacca dei giornalisti per la salute.

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